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用于 ELISA 检测的样品处理

更新时间:2025-05-19  |  点击率:121


  用于 ELISA 检测的样品处理


  在医学检测中,如何正确处理样品直接影响检测结果的准确性,尤其是 ELISA 检测中不同样品的处理方式各异,如何选择?

  在医学研究中,酶联免疫吸附试验被广泛用于检测各种生物标志物。然而,不同的样品类型需要不同的处理方法,以确保检测结果的准确性。例如,采集的血液样本需在室温或低温下静置,随后通过离心分离成血清或血浆。其中,血清是从血液中分离出来的无细胞成分,而血浆则含有纤维蛋白原和其他凝血因子。选择正确的抗凝剂也很关键。此外,对于组织匀浆和细胞裂解物,需注意添加蛋白酶抑制剂以防止目标分析物降解。正确处理细胞培养上清液,则需要通过离心去除杂质。每一步操作都至关重要,直接关系到最终的检测结果。因此,研究人员和医疗工作者在进行 ELISA 实验前,天正信达详细介绍并严格遵循相应的样品处理指南,以确保实验的成功和数据的可靠性。

  以下是用于ELISA检测的样品处理规范及注意事项:

  一、样本类型及预处理方法

  血清样本‌:

  采集后室温静置30分钟至2小时(或4℃过夜)使血液凝固

  离心条件:2000-3000×g离心15-20分钟

  关键点:避免溶血,倾斜试管扩大血清分离面


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  血浆样本‌:

  需使用EDTA/肝素抗凝管采集

  采集后30分钟内离心(700-1000×g,10-15分钟)

  注意:不可吸取中间白细胞层

  细胞培养上清‌:

  直接离心(1000×g,20分钟)去除细胞碎片

  分泌性成分检测需确保无菌收集

  组织样本‌:

  需用预冷PBS冲洗残留血液(1:9重量体积比匀浆)

  推荐加入蛋白酶抑制剂,超声或冻融辅助裂解

  二、保存条件规范

  样本类型 短期保存 长期保存 有效期

  血清/血浆 4℃(1周内) -80℃分装 1-6个月

  细胞上清 4℃(24小时) -80℃分装 1个月

  组织匀浆 4℃(立即检测) -80℃分装 3个月

  三、关键注意事项

  干扰物控制‌:

  严禁使用含NaN3的防腐剂(会抑制HRP活性)

  脂血/溶血样本需额外离心处理

  冻融要求‌:

  分装保存避免反复冻融(≤3次)

  复溶时需室温平衡后轻柔混匀

  浓度调整‌:

  预实验确定稀释倍数(建议2-500倍梯度)

  OD值超标准曲线时应稀释重测

  四、特殊样本处理

  尿液/胸腹水‌:需10000×g高速离心去除颗粒物

  红细胞裂解物‌:用4倍体积超纯水裂解后离心

  食品样本‌:需均质化处理并去除脂肪层

  注:以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师或供应商。

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