天正信达ELISA试剂盒实验中洗涤注意事项

　　天正信达ELISA试剂盒实验中洗涤注意事项

　　以下是天正信达ELISA试剂盒实验中洗涤操作的注意事项，综合关键步骤与优化建议：

　　一、洗涤液配置与选择

　　缓冲液配制‌

　　使用pH 7.2-7.4的PBST(含0.05%-0.2% Tween-20)，避免浓度过高导致包被物解吸附。

　　若样本含金属离子干扰，可添加1-5mM EDTA增强洗涤效果。

　　温度控制‌

　　洗液需预热至20-30℃，低温易导致“花板”现象(非特异性残留)。

　　二、手工洗涤操作要点

　　浸泡式洗涤‌

　　每孔注满200-300μL洗液，静置1-2分钟并间歇摇动，重复3-4次。

　　拍干时垂直扣板，避免左右甩动导致交叉污染。

　　流水冲洗式‌

　　适用于微量滴定板，水流冲击孔表面2分钟可提升洗涤效率。

　　三、洗板机使用规范

　　参数设置‌

　　洗涤量需略超包被体积(如350μL/孔)，吸液高度调至距孔底0.5-1mm以减少残留。

　　推荐3次循环洗涤，过度洗涤可能降低信号强度。

　　维护检查‌

　　每日校准注液量，残液量需≤2μL，及时更换堵塞吸头。

　　四、常见问题处理

　　现象‌ ‌原因‌ ‌解决方案‌

　　高背景信号‌ 洗涤不或交叉污染 增加洗涤次数至5-6次，优化拍干动作

　　孔间差异大‌ 洗板机吸液不均 检查吸头是否堵塞，调整抽吸位置居中

　　板底残留水渍‌ 拍干不或滤纸掉屑 使用无尘吸水纸，最后一次拍干加强力度

　　五、天正信达特别提示

　　封闭后洗涤‌：使用5% BSA封闭后，需PBST洗涤3次以去除非结合蛋白。

　　显色前处理‌：最后一次洗涤后需拍干，避免残留液体稀释底物。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实际标准，具体请咨询技术老师。

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