以下是关于固相萃取小柱使用与维护方法的详细指南,综合操作流程与维护要点整理:
一、标准操作流程
活化
反相柱(如C18):先用3-5mL甲醇润湿填料,再用等体积水/缓冲液冲洗
正相柱:使用非极性溶剂(如正己烷)活化,避免水接触
离子交换柱:需用去离子水或低浓度缓冲液预处理
上样
样品溶剂需与活化溶剂兼容(水溶性样品pH接近中性,有机相比例<10%)
控制流速≤2mL/min,避免目标物穿透
淋洗
用中等强度溶剂(如5%甲醇水溶液)去除杂质,保留目标物
体积通常为3-5mL,需优化避免目标物损失
洗脱
强溶剂(甲醇/乙腈)分2次小体积洗脱,流速0.5-1mL/min以提高回收率
酸性/碱性化合物可添加0.1%甲酸或氨水增强洗脱效率
二、维护与再生方法
柱类型 再生步骤 重复次数
硅胶基质柱 甲醇→水→甲醇冲洗,严重污染可浸泡有机溶剂后再生 3-5次
聚合物柱 有机溶剂冲洗,或超临界CO₂深度清洁 3-4次
离子交换柱 稀HCl(阳离子)或NaOH(阴离子)处理→水洗至中性 2-3次
性能验证:每次再生后测试回收率,下降>10%需弃用
三、关键注意事项
防干涸:活化后若柱床干燥需重新处理,否则吸附效率降低50%以上
密封性:手动负压装置需检查硅胶管连接,漏气会导致流速异常
存储:长期未使用的柱子需用甲醇-水混合液浸泡后冷藏保存
四、故障处理
流速过慢:检查柱床是否塌陷或筛板堵塞,可用细针轻通
回收率低:优化洗脱溶剂强度或延长接触时间
(操作细节需结合具体实验条件调整)
注:以上资料仅供参考,完整操作请以实说明为准,不同品牌可能存在细节差异。
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