以下是关于微生物赖氨酸脱羧酶(LYD)ELISA试剂盒的详细信息,综合整理自多个高可信度来源:
一、试剂盒组成与原理
核心组件
预包被板:96孔微孔板,包被抗LYD抗体。
标准品:冻干粉(如480pg/ml),需用稀释液重构。
检测抗体:HRP标记的LYD抗体,搭配显色剂(TMB)和终止液。
浓缩洗涤液:需30倍稀释后使用。
检测原理
双抗体夹心法:样本中的LYD与包被抗体结合,再与HRP标记抗体形成复合物,通过TMB显色定量。
二、实验操作步骤
样本处理
血清/血浆:离心(2000-3000g,20分钟)后取上清,避免溶血或脂血干扰。
组织匀浆:PBS匀浆后离心,建议稀释后检测。
标准品稀释
梯度稀释(如480→240→120→60→30→15 pg/ml),空白孔用稀释液。
加样与孵育
每孔加50μL样本或标准品,37℃孵育30-60分钟。
显色与读数
加TMB避光反应15分钟,终止后15分钟内测450nm OD值。
三、注意事项
质量控制:标准品与样本需做复孔,CV值应<15%。
干扰物:避免含NaN3的样本(抑制HRP活性)。
保存条件:未开封试剂盒2-8℃保存6个月,开封后板条需密封防潮。
四、技术参数
项目 参数范围
检测范围 6.25-1000pg/ml(不同品牌有差异)
灵敏度 通常<15pg/ml
适用样本 血清、血浆、组织匀浆、细胞上清等
如需具体品牌(如本生生物、天正信达)的说明书或采购信息,可参考平台。
注:以上资料仅供参考,不同品牌产品可能存在设计差异,操作前建议参考说明书。
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