以下是ELISA实验手工洗板的详细步骤及注意事项:
一、洗涤液配置
稀释比例:取25倍浓缩洗涤液,按1:24比例用双蒸水稀释(如1mL浓缩液+29mL水)。
混合要求:使用磁力搅拌器混匀5-10分钟,确保溶液均匀。
现配现用:避免长时间存放导致污染或失效。
二、洗板操作流程
加液:
将1倍洗涤液倒入酶标板每孔,用量以刚好满孔为宜(300-350μL/孔)。
使用多道移液器或排枪加液,避免孔间交叉污染。
浸泡/震荡:
静置1-2分钟(可轻晃或使用摇床)。
弃液与拍干:
甩尽液体后,在吸水纸上拍干(每拍一次更换新纸)。
注意力度,防止板条脱落或残留泡沫。
三、关键注意事项
洗涤次数:重复3-5次。
避免干燥:拍干后需立即加试剂,防止蛋白结合物失活。
吸水纸选择:需为无强氧化剂漂白、不易掉屑的材质(如一次性厨房纸巾)。
四、常见问题
假阳性风险:未拍干可能导致显色异常。
废液处理:建议使用废液桶集中收集,避免污染环境。
手动洗板与洗板机效果无本质差异,重点在于操作规范。如需视频演示,可参考以下资源:
未开封试剂盒:2-8℃保存6个月。
开封后微孔板:密封干燥保存,避免受潮。
注:以上资料仅供参考,不作为实际数据,如需其他请咨询技术老师或品牌供应商。
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