对于超低lgG胎牛血清的详解

　　这是一个在特定生命科学研究领域中非常重要的专用试剂。我们将从定义、为何需要它、如何生产、关键应用、如何选择以及注意事项等多个角度进行解析。

　　一、 什么是超低IgG胎牛血清?

　　它是胎牛血清 的一个特殊级别，其核心特征是免疫球蛋白G(IgG)的含量被极大地降低，通常远低于标准级别的胎牛血清。

       名称                货号         规格    储存条件

　　超低 IgG 胎牛血清   FBS-SG500    500ml   -20°C

　　胎牛血清(FBS)：是从母牛剖腹取出的胎牛心脏中穿刺获取的血液，经自然凝结、离心后去除血细胞、纤维蛋白等成分后得到的淡黄色上清液体。它是细胞培养中常用、有效的天然培养基添加剂，提供细胞生长所必需的生长因子、激素、营养物质和附着因子。

　　免疫球蛋白G(IgG)：是血清中最主要的一类抗体，是动物机体免疫应答的重要组成部分。但在细胞培养的某些应用中，它会成为严重的干扰因素。

　　“超低"通常没有一个全球统一的绝对值标准，但主流供应商提供的产品其IgG浓度一般低于5 μg/mL，有些甚至可低于1-2 μg/mL。而普通FBS的IgG含量通常在100-500 μg/mL范围。

　　二、 为什么需要去除IgG?——核心原因

　　在大多数常规细胞培养中，标准FBS中的IgG不会造成问题。但在以下两类关键应用中，IgG的存在会带来严重干扰：

　　免疫学实验的干扰(最主要原因)

　　抗体相关实验：如免疫沉淀(IP)、共免疫沉淀(Co-IP)、Western Blot、免疫荧光(IF)、流式细胞术 等。这些实验都需要使用抗体(通常也是IgG)来特异性识别靶蛋白。

　　问题所在：血清中残留的牛IgG可能会与实验中加入的抗体发生交叉反应。

　　与二抗反应：实验中使用的抗体制备的二抗(如兔抗小鼠IgG)无法区分小鼠IgG和牛IgG，会非特异性地结合到牛IgG上，导致背景信号高，条带模糊，结果无法解读(例如WB中出现多条非特异条带或高背景)。

　　与Protein A/G/A-L 珠子反应：IP/Co-IP实验中使用Protein A或G珠子来吸附抗体-抗原复合物。Protein A/G对多种物种的IgG的Fc段都有高亲和力，同样会强烈地、非特异性地吸附血清中的牛IgG，不仅增加背景，还会竞争性消耗珠子结合位点，降低目标蛋白的捕获效率。

　　某些特殊细胞培养的需求

　　在培养一些本身会分泌IgG的细胞时(如杂交瘤细胞、B淋巴细胞)，外源性的牛IgG会干扰对细胞自身分泌IgG的定量和分析。

　　在研究细胞自身免疫应答或信号通路时，外源IgG可能作为一种非特异性刺激物，激活某些细胞表面的Fc受体，从而干扰实验结果。

　　三、 如何生产出超低IgG血清?——主要工艺

　　降低血清中IgG含量的核心技术是色谱纯化技术，最常见的是：

　　亲和色谱：使用Protein G 或 Protein A 琼脂糖凝胶作为色谱柱填料。Protein G/A对IgG的Fc段具有高的特异性和亲和力。当血清流经色谱柱时，IgG被特异性捕获并留在柱子上，而其他血清成分(生长因子、激素等)则流过并被收集起来。最终收集到的流出液就是IgG含量极低的血清。

　　其他方法：也可能结合离子交换色谱或其他物理化学方法进行进一步纯化。

　　重要提示：这个纯化过程在去除IgG的同时，不可避免地也会损失一部分其他有价值的成分，尤其是某些与IgG结合或性质相似的生长因子和蛋白。因此，超低IgG血清在支持细胞生长方面可能略逊于未经处理的顶级标准FBS。供应商会努力优化工艺以最大限度地保留生长支持能力。

　　四、 主要应用领域

　　蛋白质相互作用研究：Co-IP 和 IP 实验的血清，能显著降低非特异性结合，提高信噪比。

　　蛋白质免疫印迹：特别是当检测的蛋白分子量与IgG重链(~55 kDa)或轻链(~25 kDa)接近时，使用超低IgG血清可避免来自血清IgG的干扰条带，使结果清晰可靠。

　　流式细胞术：用于细胞表面或胞内抗原的检测，能降低非特异性荧光背景，使细胞群分群更清晰。

　　免疫细胞化学/免疫荧光(ICC/IF)：减少背景染色，提高成像质量。

　　杂交瘤细胞培养与抗体生产：便于准确测定杂交瘤细胞自身产生的单克隆抗体，避免牛IgG的污染。

　　病毒学研究：某些病毒培养和中和实验中也需避免抗体干扰。

　　五、 如何选购和使用?

　　确认必要性：并非所有细胞培养都需要。只有在进行上述免疫学实验或培养特殊细胞时才有必要使用。常规细胞传代扩增使用标准FBS更经济。

　　关注关键指标：

　　IgG浓度：要求供应商提供CoA(分析证书)，确认其IgG含量确实达到“超低"水平(如<5 μg/mL)。

　　细胞生长性能测试：通过查阅CoA，了解该批血清对常见细胞系(如CHO、HeLa、Vero、MSC等)的生长支持效率(倍增时间、饱和密度等)，确保其能满足你的细胞生长需求。

　　内毒素含量：内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁成分，对细胞有毒性。超低IgG血清的内毒素水平也应较低(如<10 EU/mL)。

　　进行测试：在大规模使用前，务必先用你的特定细胞系和实验方法进行测试，验证其生长性能和降低背景的效果。

　　注意兼容性：确保实验中所用的抗体(一抗和二抗) 不会与可能残留的微量牛IgG发生交叉反应。例如，如果你的二抗是“抗牛IgG"，那么显然不能使用任何胎牛血清。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒

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