以下是ELISA样本分装避免反复冻融的规范操作指南,结合不同样本类型和保存条件进行说明:
一、分装基本原则
单次用量分装
根据实验需求预估单次用量(如50-100μL/管),分装至无菌EP管或冻存管中。
推荐使用带螺旋盖的冻存管(如1.5mL/2mL规格),避免密封不严导致样本蒸发或污染。
标记规范
标注样本编号、日期、浓度(如适用)及冻融次数(初始标记为0次)。
二、分装操作步骤
血清/血浆样本
离心后立即分装,避免长时间室温放置导致蛋白降解。
使用预冷冻存管(冰上操作),分装后快速密封。
细胞上清/裂解液
离心去除杂质后,按200-500μL/管分装(避免过满导致冻裂)。
组织匀浆液
按1:9比例稀释后分装,建议每管≤1mL(减少冻融体积波动影响)。
三、冻存与解冻要点
冻存条件
短期保存:-20℃(≤1个月)
长期保存:-80℃(≤6个月)或液氮(>6个月)
解冻方法
15-25℃水浴快速融化(避免冰晶破坏蛋白结构)
解冻后立即使用,未用完部分丢弃(禁止二次冻存)
四、特殊注意事项
避免气泡:分装时枪头贴壁缓慢加样,减少气泡产生。
冻存管选择:优先使用无DNase/RNase的冻存管(尤其用于核酸相关检测)。
冻融记录:每次冻融后更新标记,建议冻融次数≤3次。
通过规范分装和冻存流程,可最大限度保持样本稳定性,确保ELISA检测结果的可靠性。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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