ELISA实验时,样本处理的基本步骤
因样本类型而异,以下是常见样本的标准操作流程及注意事项:
一、血清样本
采集与静置:使用无抗凝剂试管采集血液,室温静置1小时或4℃过夜(倾斜放置可加速析出)。
离心:4℃条件下1000×g离心15-20分钟,收集上清液。
保存:分装后-20℃/-80℃保存,避免反复冻融。
二、血浆样本
抗凝处理:使用EDTA、肝素钠等抗凝剂采血管,采集后30分钟内完成离心。
离心条件:4℃、1000×g离心15分钟,避免溶血或高脂样本。
三、细胞培养上清
直接1000×g离心20分钟去除细胞碎片,上清液分装冻存。
四、细胞裂解液
裂解方法:反复冻融或超声破碎,加入蛋白酶抑制剂。
离心:1500×g离心10分钟去除碎片。
五、组织匀浆
预处理:冰浴中匀浆,按1:9(组织重量体积)比例处理。
离心:5000×g离心5-10分钟取上清。
关键注意事项:
避免溶血、细菌污染及反复冻融。
特殊样本需专业采集。
不同样本需根据试剂盒要求调整处理细节。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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