有哪些常见的ELISA样本污染类型?
在ELISA实验中,样本污染主要分为以下几类,需特别注意防控:
一、外源性污染
微生物污染
细菌、真菌等微生物污染样本可能导致假阳性,其代谢产物或细胞成分会与试剂发生非特异性反应。例如,细菌污染可使培养基浑浊并改变pH值,而真菌污染常表现为菌丝或孢子形成。
化学物质污染
实验环境中残留的消毒剂(如次氯酸钠)或容器清洁不净引入的荧光物质,可能干扰显色反应或导致假阳性。
二、内源性干扰
溶血样本
红细胞破裂释放的血红蛋白具有类过氧化物酶活性,会增强非特异性显色,导致结果偏高。
样本降解
反复冻融或储存不当会导致目标蛋白(如细胞因子)降解,引发假阴性;样本中纤维蛋白原等成分也可能非特异性结合抗体。
三、操作相关污染
交叉污染
使用同一移液器或枪头处理不同样本,或洗板不净残留酶标物,均可能导致样本间交叉污染。
气溶胶污染
核酸实验中阳性质控品或扩增产物形成的气溶胶可能污染ELISA样本,尤其在高灵敏度检测中需严格分区操作。
四、特殊污染类型
支原体污染
细胞培养来源的样本若被支原体污染,其代谢产物可能干扰抗原抗体结合,需通过分离培养或PCR法检测。
类毒素干扰
检测霉菌毒素(如黄曲霉毒素)时,样本中结构类似物可能竞争性结合抗体,需通过净化步骤排除干扰。
通过规范样本处理(如分装冻存、避免溶血)、严格分区操作及定期校准设备,可有效降低污染风险。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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