ELISA实验：酶联免疫吸附测定原理

　　ELISA实验：酶联免疫吸附测定原理

　　ELISA(酶联免疫吸附测定)是一种基于抗原-抗体特异性结合的高灵敏度免疫检测技术，通过酶催化显色反应实现目标物质的定性或定量分析‌。其核心原理如下：

　　基本原理‌

　　固相包被‌

　　将抗原或抗体固定在聚苯乙烯微孔板等固相载体表面，保持其免疫活性‌。

　　酶标记结合‌

　　使用辣根过氧化物酶(HRP)或碱性磷酸酶(AP)标记抗体/抗原，形成酶标复合物，既保留免疫活性又具备酶催化能力‌。

　　显色反应‌

　　加入底物(如TMB或PNPP)后，酶催化底物生成有色产物，颜色深浅与目标物浓度成正比，通过酶标仪测定吸光度值定量‌。

　　Elisa的检测原理

　　ELISA的定义和基本原理

　　ELISA的三个核心步骤

　　夹心法实验流程

　　ELISA的三种检测类型

　　ELISA的总结

　　技术特点‌

　　高灵敏度‌：检测限可达皮克级(pg/mL)‌。

　　特异性强‌：依赖抗原-抗体结合，单克隆抗体技术进一步提升了特异性‌。

　　方法多样‌：包括双抗体夹心法(大分子)、竞争法(小分子)、间接法(抗体检测)等‌。

　　应用场景‌

　　医学诊断‌：HIV、HBV等传染病检测，肿瘤标志物筛查‌。

　　科研领域‌：细胞因子定量、药物药效评价‌。

　　食品安全‌：兽药残留、过敏原检测‌。

　　关键注意事项‌

　　加样精度‌：移液器需校准，避免气泡或孔壁残留导致误差‌。

　　温度控制‌：试剂与样本需平衡至室温，减少动力学差异‌。

　　洗涤‌：手工拍板需垂直操作，机器洗板需检查冲洗头通畅‌。

　　如需进一步了解实验流程，可参考：ELISA操作视频演示‌。

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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