白介素Elisa试剂盒操作步骤

　　标签：天津天正信达 RNA逆转录试剂盒 逆转录试剂盒 PCR试剂盒 提取试剂盒

　　白介素ELISA试剂盒操作步骤如下：

　　试剂准备‌：将试剂盒组分平衡至室温30分钟，浓缩洗涤液按1:19稀释。

　　加样‌：

　　标准品梯度稀释：冻干标准品用稀释液溶解后，按2倍稀释法配制250pg/ml至0pg/ml系列浓度

　　样本处理：血清/血浆3000rpm离心10分钟，细胞上清1200rpm离心5分钟

　　每孔加入50μL标准品或样本，空白孔加稀释液，37℃孵育90分钟

　　洗涤‌：弃去液体，每孔加300μL洗涤液，静置30秒后拍干，重复5次

　　加检测抗体‌：每孔加50μL生物素标记抗体，37℃孵育60分钟

　　加酶标试剂‌：每孔加50μL HRP标记试剂，37℃避光孵育30分钟

　　显色‌：每孔加100μL TMB显色液，37℃避光孵育15-20分钟

　　终止反应‌：每孔加50μL终止液，混匀至变黄

　　读数‌：5分钟内用酶标仪450nm测定OD值

　　注意事项‌：

　　孵育时间和温度需严格控制

　　洗涤，避免高背景

　　终止液为强酸，操作时需佩戴防护装备

　　标准曲线R²<0.99时需检查稀释或仪器状态

　　注：以上仅供参考，本试剂仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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