人多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)ELISA试剂盒使用说明书
BS-1939 人多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)ELISA试剂盒
用双抗体夹心法,检测血清、血浆或组织匀浆中PARP1,检测波长450 nm,保存条件2–8℃,仅限科研使用。
- 检测原理:预包被抗-PARP1捕获抗体 + 生物素化检测抗体 + 链霉亲和素-HRP复合物 + TMB显色(蓝→黄,终止后),OD值与PARP1浓度正相关。
- 样本类型:人血清、血浆(EDTA/肝素/柠檬酸钠抗凝)、组织匀浆(PBS pH 7.4)、细胞裂解液或培养上清;避免含NaN₃及溶血/浑浊样本。
- 样本处理:2000–3000 ×g 离心10–20 min,上清分装–20℃或–80℃保存(避免反复冻融);使用前室温平衡15–30 min。
- 典型操作流程:
① 标准品梯度稀释(常见范围 0.78–50 ng/mL 或 100–3200 pg/mL);
② 加样(标准品/样本 50–100 μL/孔);
③ 加HRP标记检测抗体(100 μL/孔),37℃温育60 min;
④ 洗板(20×浓缩洗涤液稀释后洗5×);
⑤ 显色(TMB 10–15 min 避光);
⑥ 终止(2 M H₂SO₄ 50 μL/孔);
⑦ 450 nm读数(15 min内完成)。
- 关键注意事项:严禁混用不同批号试剂;洗板后勿干孔;底物TMB应无色,变蓝则失效;终止液为稀硫酸;结果需以同板标准曲线计算。
- 试剂盒组成(96T示例):预包被板、标准品(冻干)、检测抗体(生物素化)、SA-HRP、TMB显色液A/B、终止液、20×洗涤液、样本/抗体稀释液;需自备酶标仪、精密移液器、37℃孵育箱、蒸馏水。
- 有效期:多数为 6个月(2–8℃);开封后板条密封+4℃保存≤1周。
不同品牌的稀释倍数、温育时间、标准品浓度范围略有差异,实际操作必须以所购试剂盒内附纸质说明书为准。若已购买但未附说明书,请联系供应商索取PDF版。(仅“科研用途")。
注:以上科研产品资料供参考!
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