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大鼠4-羟基雌二醇(4-OH-E2)Elisa试剂盒使用说明书

发表时间:2025/6/26  |  点击率:76
 
提 供 商: 天津天正信达生物科技有限公司 资料大小:
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  大鼠4-羟基雌二醇(4-OH-E2)Elisa试剂盒使用说明书

  以下是天正信达关于大鼠4-羟基雌二醇(4-OH-E2)ELISA试剂盒的标准化操作指南及关键注意事项:

  一、试剂盒核心参数

  检测原理‌

  双抗体夹心法,包被抗4-OH-E2抗体与HRP标记抗体形成复合物,TMB显色后通过OD值定量

  检测范围:6ng/L-250ng/L(部分试剂盒为2-64pg/mL)

  样本要求‌

  样本类型‌ ‌处理规范‌ ‌保存条件‌

  血清 静置1-2小时后离心(3000×g,10分钟) -20℃保存,避免反复冻融

  血浆 EDTA抗凝,离心后取上清(5000×g,15分钟) 分装冻存≤3次

  组织匀浆 生理盐水匀浆后离心(3000×g,10分钟) 立即检测或-80℃保存

  二、实验操作流程

  标准品稀释‌

  原倍标准品(400ng/L)按1:1梯度稀释至12.5ng/L,需使用专用稀释液

  A[原倍标准品] --> B[200ng/L]

  B --> C[100ng/L]

  C --> D[50ng/L]

  D --> E[25ng/L]

  E --> F[12.5ng/L]

  加样与孵育‌

  每孔加样50μL(样本需预稀释5倍),37℃孵育30分钟,封板膜密封

  空白孔仅加稀释液,标准孔与样本孔需平行双复孔

  显色与终止‌

  依次加入TMB显色液(A+B液),避光反应15分钟,终止液加入顺序需一致

  三、质量控制要点

  数据有效性标准‌

  标准曲线R²≥0.9900,空白孔OD值<0.1

  批内变异系数(CV)应<15%

  干扰物规避‌

  避免使用含NaN3样本(抑制HRP活性)

  溶血样本需离心去除血红蛋白干扰

  四、异常处理建议

  高背景值‌:检查洗涤是否充分(建议浸泡30秒,重复6次)

  无信号‌:验证酶标试剂活性及移液准确性

  重复性差‌:校准移液器并统一操作时间窗

  注‌:不同品牌试剂盒存在参数差异,建议以实际说明书为准。

  注:以上资料仅供参考,如需具体品牌产品的完整技术参数,建议提供货号或厂商名称以便进一步确认。

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