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生化检测试剂盒
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以下是鸡β干扰素(IFN-β)ELISA试剂盒的实验说明书核心内容整理:
TZXD-4389 鸡β干扰素(IFN-β)ELISA试剂盒
一、检测原理
采用双抗体夹心法,通过预包被的鸡IFN-β抗体捕获样本中的目标蛋白,再与HRP标记的检测抗体结合形成复合物,经TMB显色系统反应后,450nm波长下测定OD值,颜色深度与IFN-β浓度成正比。
二、试剂盒组成
预包被微孔板:96孔或48孔规格(抗鸡IFN-β抗体包被)
标准品:6浓度梯度(常见范围:25-800pg/mL或15.625-1000pg/mL)
酶标抗体:HRP标记的检测抗体
显色系统:TMB底物A/B液
终止液:2M硫酸溶液
浓缩洗涤液:20×或30×需稀释使用
三、样本处理要求
血清/血浆:3000rpm离心10-30分钟,避免溶血
细胞培养上清:直接离心去除颗粒物
组织匀浆:按重量比加入PBS匀浆后离心取上清
保存条件:-20℃分装,避免反复冻融
四、操作步骤
平衡试剂:所有组分室温平衡20-30分钟
加样:标准品/样本按50-100μL/孔加入
孵育:37℃反应30-60分钟,洗涤3-5次
显色:加入TMB避光反应10-15分钟
终止与检测:加终止液后立即测定450nm OD值
五、关键参数
检测范围:2-48ng/L或15.625-1000pg/mL(不同品牌有差异)
灵敏度:检测限5.7pg/mL
精密度:板内/板间变异系数<10%
有效期:6-12个月(2-8℃保存)
六、注意事项
不同批次试剂不可混用
显色时间需严格控制,强光会干扰结果
加样需保持速度一致,避免孔间时间差过大
酶标板开封后需密封防潮保存
完整操作请以试剂盒内附说明书为准,部分品牌提供免费代测服务。
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