避免样本损失!冻存管液氮存储的5大关键注意事项

　　避免样本损失!冻存管液氮存储的5大关键注意事项

　　天正信达冻存管液氮存储操作指南

　　一、‌存储前准备‌

　　冻存管选择‌

　　优先选用聚丙烯(PP)材质内旋盖冻存管，耐-196℃低温且密封性强，可有效防止液氮渗入。

　　容量建议为1.5-2.0mL，避免过满(留10%-20%空间防冻胀破裂)。

　　样本处理‌

　　细胞样本需调整至对数生长期(活力>95%)，并加入含保护剂(如10% DMSO+90% FBS)的冻存液。

　　菌种样本需与保护剂(如甘油)混合均匀，浓度控制在10⁸-10¹⁰个/mL。

　　二、‌降温程序‌

　　梯度降温‌(减少冰晶损伤)

　　4℃平衡30分钟 → -20℃保持2小时 → -80℃预冷4小时 → 最终转移至液氮罐气相区(-150℃)过渡1小时。

　　快速降温‌(适配无血清冻存液)

　　使用程序降温盒(如Mr. Frosty)，以-1℃/min速率直接降至-80℃。

　　三、‌液氮存储规范‌

　　存储模式选择‌

　　气相存储‌(-150℃~-190℃)：适合频繁存取的临床样本，温度波动±3℃。

　　液相存储‌(-196℃)：适合长期保存(>5年)，但需确保冻存管密封性。

　　安全措施‌

　　冻存管需装入二级容器(如冻存盒或纱布袋)，避免直接接触液氮引发爆炸。

　　标记信息建议激光雕刻，防止液氮环境下标签脱落。

　　四、‌复苏与维护‌

　　快速复苏‌

　　从液氮中取出后立即置入37℃水浴，轻柔摇动1-2分钟至融化。

　　定期检查‌

　　监测液氮罐液位(保持≥1/3容量)，并定期补充液氮。

　　检查冻存管密封性，发现结霜或渗漏立即更换。

　　五、‌风险提示‌

　　操作时需穿戴防护装备(低温手套、护目镜)，防止冻伤或爆管伤害。

　　避免频繁开盖，减少液氮挥发和温度波动。

　　(注：长期存储建议每5年检测样本活性。)

　　注：以上资料仅供参考，如需完整说明书，建议联系供应商获取最新版本。

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