以下是关于罗氏LightCycler480适配八联管的详细说明,结合实验操作要点和耗材特性进行整理:
一、八联管的核心特性
材质与设计
采用耐300℃高温的聚丙烯材质,纯度达99.9%,超薄均匀壁厚设计确保热传导效率,减少实验循环时间。
分为透明和乳白色两种规格(如V1082-C透明管、V1082-M乳白管),乳白色管更适合荧光定量检测,减少光散射干扰。
兼容性
专为LightCycler480设计,适配其温控模块和光学检测系统,支持0.1ml和0.2ml两种容量(如V2081-C 0.2ml透明管)。
可配套无裙边96孔板辅助器(货号V-96AD),实现小通量实验的灵活操作。
二、使用流程与注意事项
实验准备
耗材选择:根据实验需求选择八联管规格(如0.1ml用于低体积反应,0.2ml用于标准反应),确保管盖密封性良好。
辅助工具:需搭配专用辅助器(如V-96AD棕色辅助器)固定八联管,避免热循环中移位。
加样与封盖
使用移液器精确分装反应液(推荐体积10-100μL),避免气泡产生,封盖后离心数秒确保混合均匀。
若使用单数管,需用空管配平以保持仪器平衡。
仪器操作
在LightCycler480软件中选择对应程序,设置温度参数(如预变性95℃ 10分钟),注意选择正确的耗材类型(八联管或96孔板)。
将八联管对称放入样品槽,确保与温控模块紧密接触,启动前检查热盖温度(通常105℃)。
三、常见问题与解决方案
信号异常:若荧光值波动,检查管盖是否密封或是否存在冷凝水,建议更换乳白色管减少光学干扰。
耗材变形:高温循环后若发现管体变形,需确认材质耐温性(≤300℃)或避免超负荷使用。
四、替代方案与扩展应用
国产兼容耗材:部分厂商提供非原装八联管,价格更低但需验证光学性能和热传导稳定性。
高通量扩展:需搭配384孔板(如V3841-M)时,建议使用原装耗材以确保数据准确性。
通过规范操作和耗材适配,可充分发挥LightCycler480的高灵敏度(检测单拷贝基因)和快速循环(40分钟完成40循环)优势。
注:以上资料仅供参考,完整操作请以实说明为准,不同品牌可能存在细节差异。
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