倒置培养皿的注意事项有哪些?
培养基凝固后再倒置
需等待琼脂凝固(约30分钟),避免未凝固时倒置导致培养基变形或与皿底分离。
若培养基未凝固即倒置,可能因重力作用导致厚度不均或边缘开裂。
保持水平放置
倒置后需确保培养皿水平放置,防止培养基接触皿盖影响菌落生长或冷凝水滴落污染。
控制冷凝水量
若冷凝水过多(如倾注温度过高导致),需在无菌条件下吹干表面水分,避免菌落蔓延或计数误差。
倾注平板计数时,可覆盖一层薄琼脂以减少冷凝水影响。
操作规范
倒置后单手取放培养皿,避免频繁开盖污染。
厌氧培养等特殊场景需正置并密封,倒置会破坏厌氧环境。
培养基倾注量优化
常规培养(≤48小时):18-20ml琼脂(90mm培养皿)。
长期培养或高温条件(>40℃):增至25ml,防止水分蒸发过快导致干裂。
常见问题与解决方案
气泡处理:缓慢倾倒培养基,将气泡留在容器底部;若平板内残留气泡,可轻摇使气泡移至边缘。
温度控制:倾注时培养基温度需45℃(手背感觉烫但不烫手),过高易产生冷凝水,过低易凝固不均。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 ELISA试剂盒
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