大鼠骨胶原交联(CrossLaps)ELISA试剂盒的实验原理主要基于双抗体夹心法酶联免疫吸附测定技术,其核心步骤和机制如下:
BS-3307大鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒
一、双抗体夹心法原理
固相抗体包被:微孔板预包抗大鼠CrossLaps捕获抗体,形成固相结合位点。
抗原结合:样本中的CrossLaps与固相抗体特异性结合,形成固相抗体-抗原复合物。
酶标记检测:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗,与抗原另一表位结合,形成“夹心"结构。
显色反应:加入TMB底物,HRP催化显色(蓝色→黄色),450nm测吸光度,浓度与颜色深度呈正比。
二、技术特点
高特异性:双抗体设计避免交叉反应,适用于血清、血浆等复杂样本。
宽检测范围:典型灵敏度达pg/mL级(如15.63-1000 pg/mL)。
标准化流程:含预包被板、酶标二抗、标准品及显色系统,支持定量分析。
三、操作关键点
样本处理:血清需避免溶血,组织匀浆需离心去杂质。
温育控制:每一步需充分温育(通常37℃ 30-60分钟)。
洗涤:减少非特异性结合导致的假阳性。
四、应用场景
主要用于骨质疏松、关节炎等疾病研究中骨代谢标志物的检测。
注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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