Elisa竞争法原理及结果判读

　　Elisa竞争法原理及结果判读
 

　　ELISA竞争法是一种通过抗原竞争结合抗体来检测小分子物质(如激素、药物)的免疫学方法，其核心原理是标记抗原与样本中待测抗原竞争结合固相抗体的有限结合位点，最终显色强度与待测物浓度呈反比关系‌。以下是关键要点：
 

　　一、竞争法原理
 

　　竞争机制‌：固相抗体包被微孔板后，样本中的待测抗原与酶标抗原竞争结合抗体，待测抗原浓度越高，结合的酶标抗原越少‌。
 

　　信号反比关系‌：显色强度(OD值)与待测物浓度成反比，即样本浓度高时显色浅，浓度低时显色深‌。
 

　　适用场景‌：适用于小分子抗原检测，因其仅需一个结合表位即可竞争‌。
 

　　二、结果判读标准
 

　　显色分析‌：
 

　　标准品孔应呈现梯度显色，最高浓度孔显色最浅(因标记物结合少)‌。
 

　　样本孔显色越浅，表明待测物浓度越高‌。
 

　　OD值判定‌：
 

　　标准曲线需满足相关系数(R值)>0.99，样本OD值应在曲线范围内‌。
 

　　若样本OD值超出范围，需稀释后重测‌。
 

　　异常处理‌：
 

　　高背景可能因封闭不充分或洗涤不净，需优化封闭条件或增加洗涤次数‌。
 

　　白板(无显色)可能因酶标抗原失活或抗体失效，需检查试剂活性‌。
 

　　三、与夹心法的区别
 

　　竞争法显色强度与浓度成反比，而夹心法呈正比，两者结果判读方向相反‌。竞争法操作步骤更少(仅需一次温育)，但需使用大量酶标抗原‌。
 

　　注：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
 

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