有哪些方法可以提高ELISA实验的重复性?
以下是提高ELISA实验重复性的关键方法,天正信达结合操作优化和质控要点:
一、标准化操作流程
移液一致性
使用校准后的多通道移液器,采用吸头预润湿技术减少气泡,确保加样体积和速度一致。
洗板控制
优先使用洗板机保证每孔洗涤均匀,手工洗板时需控制力度和时间,避免孔间污染。
孵育条件
覆盖板盖减少边缘效应,确保孵育温度和时间严格统一(如37℃±0.5℃)。
二、试剂与样本处理
试剂平衡与保存
所有试剂使用前需平衡至室温,避免反复冻融,不同批次试剂不可混用。
样本制备
避免溶血或高脂样本,冻融样本需充分混匀,浑浊样本需离心后检测。
三、质控与验证
复孔检测
设置复孔计算平均值,批内CV应<10%,批间CV<15%。
对照设置
每板需包含阴阳性对照及标准曲线(R²≥0.99),异常值需排查操作误差。
四、环境与设备管理
温控校准
维持环境温度18-25℃,定期校准水浴箱和酶标仪。
避免干扰
显色时避光操作,封板膜不可重复使用,边缘孔可增加空白孔缓冲。
通过上述措施可显著降低CV值,提升实验精密度。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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