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如何判断ELISA试剂是否选择正确?

更新时间:2025-10-28  |  点击率:133
  如何判断ELISA试剂是否选择正确?
 
  一、种属匹配性验证
 
  样本来源确认‌:需严格匹配试剂盒种属(如人、小鼠、犬等),跨种属检测会导致假阴性‌。例如,犬α干扰素检测必须选择犬专用试剂盒,不可用人或小鼠试剂盒替代^[用户个性化信息]^。
 
  交叉反应测试‌:通过预实验验证抗体是否与其他类似分子(如犬干扰素β)发生交叉反应,特异性差的试剂盒会产生假阳性‌。
 
  二、性能参数评估
 
  灵敏度与检测范围‌:
 
  高灵敏度试剂盒(检测限≤1 pg/mL)适用于低表达样本(如健康犬血清)‌
 
  宽范围试剂盒(如10-2000 pg/mL)适合高浓度样本(炎症模型)‌
 
  回收率与线性‌:加标回收率应在80%-120%之间,稀释线性R²需≥0.98‌
 
  三、样本兼容性测试
 
  基质效应排查‌:
 
  鸡沙门氏菌抗体检测需验证溶血样本(血红蛋白干扰)和抗凝剂(EDTA/肝素)影响‌
 
  细胞上清样本需确认无FBS残留干扰‌
 
  预实验必要性‌:通过3-5个样本梯度稀释验证OD值是否落在标准曲线线性区间‌
 
  四、质量控制指标
 
  批间精密度‌:板内CV应<10%,板间CV<15%‌
 
  稳定性验证‌:试剂盒在4℃/25℃存放7天后,信号衰减应<20%‌
 
  五、文献与供应商评估
 
  文献引用‌:优先选择被SCI论文验证的试剂盒(如犬干扰素检测引用≥5篇文献)‌
 
  资质审查‌:要求供应商提供完整质控报告(含交叉反应、干扰实验数据)‌
 
  通过上述系统性验证,可确保ELISA试剂选择的准确性。若出现异常结果(如标准曲线非线性),需优先排查种属匹配性和样本基质干扰‌。
 
  注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
 
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