如何正确操作小鼠白介素ELISA试剂盒?

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　　如何正确操作小鼠白介素ELISA试剂盒?

　　小鼠白介素ELISA试剂盒操作需严格遵循以下步骤：

　　一、实验前准备

　　试剂平衡‌：将试剂盒和样本从冰箱取出，室温平衡1小时。

　　洗涤液配制‌：浓缩洗涤液若出现结晶，需室温溶解后按比例稀释。

　　二、操作步骤

　　包被‌：用包被缓冲液稀释抗体至1-10μg/mL，加入反应孔0.1mL，4℃过夜。

　　加样‌：弃去孔内溶液，加入待检样品0.1mL，37℃孵育1小时。

　　加酶标抗体‌：加入新鲜稀释的酶标抗体0.1mL，37℃孵育0.5-1小时。

　　显色与终止‌：加入TMB底物溶液0.1mL，37℃避光孵育10-30分钟，加入终止液0.05mL。

　　结果判定‌：酶标仪450nm读取OD值，通过标准曲线计算样品浓度。

　　三、注意事项

　　温控‌：所有试剂和样本需平衡至室温，避免高温孵育。

　　洗板‌：充分洗涤，避免残留液体影响结果。

　　样本处理‌：避免溶血和反复冻融，血清建议分装-80℃保存。

　　设备校准‌：酶标仪检测前需用空白对照调零。

　　四、常见问题

　　显色异常‌：底物液变蓝需更换，避免强光直射。

　　结果偏差‌：检查样本质量、试剂匹配性及操作细节。

　　注：以上仅供参考，本试剂仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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