以下是关于人白介素12(IL-12)ELISA试剂盒的说明书核心内容整理: 一、检测原理 采用双抗体夹心法,通过预包被抗人IL-12抗体捕获样本中的IL-12,再与生物素标记的二抗及HRP酶联物结合,最终经TMB显色定量检测。 二、试剂盒组成 组分 规格 保存条件 预包被酶标板 96孔/板(12孔×8条) 2-8℃干燥保存 重组IL-12标准品 2ng/瓶或10ng/管 -20℃冻存 HRP标记检测抗体 6-12ml/瓶 2-8℃避光 TMB底物液 12ml/瓶 2-8℃避光 20×浓缩洗涤液 50ml/瓶 室温(使用前稀释) 三、样本要求 类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞上清液、组织匀浆 处理: 避免溶血或反复冻融; 含NaN3的样本需透析处理(NaN3抑制HRP活性); 短期保存于-20℃,长期保存需-80℃。 四、操作步骤 标准品稀释:按说明书梯度稀释(如60ng/L→3.75ng/L); 加样温育: 样本/标准品50μL/孔,37℃孵育60分钟; 加入HRP标记抗体100μL/孔,继续孵育60分钟; 洗涤:手工洗板需重复5次,拍干; 显色:加入TMB底物50μL/孔,避光反应15分钟; 终止与检测:加终止液50μL/孔,15分钟内450nm测OD值。 五、技术参数 项目 规格 检测范围 15.63-2000pg/mL(不同品牌差异) 灵敏度 <5.47pg/mL 批内/批间精密度 CV<8%/CV<10% 有效期 6个月(2-8℃保存) 六、注意事项 安全操作: 避免接触终止液(含硫酸)和TMB底物,接触后立即冲洗; 质量控制: 标准曲线R²需≥0.99; 空白孔OD值应<0.1。 适用范围:仅限科研,不用于临床诊断。 如需具体品牌操作细节,请参考对应试剂盒说明书。 注:以上资料仅供参考,不作为实际标准,如需更详细的标准对比,可进一步询技术老师或是供应品牌商。 |