以下是山羊γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒的说明书核心内容整理: 一、试剂盒基本信息 检测原理:双抗体夹心法,通过HRP酶标记抗体与TMB显色定量检测IFN-γ浓度 规格:48T/96T(可拆条) 有效期:6个月(2-8℃保存)或12个月(-20℃保存) 二、样本处理要求 样本类型 处理方法 保存条件 血清 室温凝固2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟取上清 -20℃/-80℃避免反复冻融 血浆 EDTA/肝素抗凝,采集后30分钟内2-8℃离心(1000×g,15分钟) 同上 组织匀浆 PBS冲洗后匀浆,3000×g离心10分钟取上清 分装冻存于-80℃ 细胞上清 直接离心(3000×g,10分钟)去除颗粒 -20℃短期保存 三、操作步骤 标准品稀释:按说明书梯度稀释(如0-1600pg/mL) 加样孵育: 加入50μL标准品/样本至预包被板,37℃孵育60分钟 加入HRP标记抗体100μL/孔,继续孵育60分钟 洗涤:手工洗板需重复5次,拍干 显色:加入TMB底物50μL/孔,避光反应15分钟 终止检测:加终止液50μL/孔,15分钟内450nm测OD值 四、注意事项 质量控制: 标准曲线R²需≥0.99,空白孔OD值<0.1 避免溶血或NaN3污染(抑制HRP活性) 安全提示: 终止液含硫酸,接触后立即冲洗 禁止用嘴吸取试剂 适用范围:仅限科研,不用于临床诊断 如需具体品牌操作细节,可参考对应试剂盒外包装说明。 |