以下是 大鼠4-羟基雌二醇(4-OH-E2)ELISA试剂盒的说明书核心内容整理： 一、实验原理 采用双抗体夹心法： 包被抗体固定于微孔板，捕获样本中的4-OH-E2抗原。 加入HRP标记抗体形成复合物，TMB显色后测定OD值(450nm)，浓度与颜色深度呈正相关。 二、试剂盒组成 组分 规格/说明 预包被微孔板 12孔×8条(96T)或48孔 标准品(400ng/L) 冻干粉，需用稀释液重构 酶标试剂 HRP标记抗体，6ml 显色剂(TMB A/B液) 避光保存，现配现用 30倍浓缩洗涤液 使用前按1:29稀释 三、样本处理 血清/血浆： 室温凝固后离心(2000-3000转/分，20分钟)，避免溶血或NaN3污染。 分装保存于-20℃，避免反复冻融。 组织匀浆：按1:9比例与PBS冰上研磨。 四、操作步骤 标准品稀释： 原倍标准品(400ng/L)梯度稀释至12.5-200ng/L。 加样与温育： 标准品/样本各50μL，37℃孵育30分钟。 洗涤： 手工洗板5次，拍干(避免孔间交叉污染)。 显色与终止： 加TMB避光反应10-20分钟，终止后15分钟内检测。 五、注意事项 质量控制： 复孔检测，批内CV<10%。 显色时间需严格统一。 干扰因素： 避免使用含NaN3或强氧化剂的样本。 六、技术参数 项目 参数 检测范围 12.5-200ng/L(或2-64pg/mL) 灵敏度 ≤6ng/L 有效期 6个月(2-8℃保存) 完整操作请以试剂盒内附说明书为准，不同品牌可能存在差异。 注：以上资料仅供参考，完整操作请以试剂盒内附说明书为准。 | 
