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兔Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)Elisa试剂盒说明书

发表时间:2025/6/16  |  点击率:93
 
提 供 商: 天津天正信达生物科技有限公司 资料大小:
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  兔Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)Elisa试剂盒说明书

  以下是天正信达对兔Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒说明书的核心内容及操作要点:

  BS-4220   兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒  96T/48T

  一、‌实验原理‌

  采用双抗体夹心法检测样本中PⅢNT浓度。包被抗体与样本中的PⅢNT结合后,依次加入标记抗体、HRP标记亲和素及TMB底物显色,颜色深度与目标物浓度成正比。

  二、‌试剂盒组成‌

  预包被微孔板(96T/48T)

  PⅢNT标准品(冻干粉,需蒸馏水复溶)

  生物素标记抗体、HRP标记亲和素

  TMB底物A/B液、终止液(2M H₂SO₄)

  30×浓缩洗涤液(需稀释)

  三、‌样本处理‌

  血清/血浆‌:

  全血室温凝固10-20分钟后,2000-3000rpm离心20分钟,避免溶血。

  血浆需用EDTA/肝素抗凝,离心后分装保存于-20℃(避免反复冻融)。

  组织匀浆‌:PBS匀浆后离心取上清。

  四、‌操作步骤‌

  标准品稀释‌:按说明书梯度稀释(通常设5-7个浓度点)。

  加样‌:

  标准品孔:50μL/孔

  样本孔:10μL样本+40μL稀释液(5倍稀释)。

  温育‌:37℃孵育30分钟,洗涤5次(拍干)。

  显色‌:依次加底物A/B各50μL,37℃避光反应15分钟。

  终止与检测‌:加终止液后15分钟内测450nm OD值。

  五、‌注意事项‌

  试剂保存‌:未开封试剂盒2-8℃保存;复溶标准品需弃用剩余部分。

  操作规范‌:

  使用一次性吸头避免交叉污染。

  洗涤时避免金属器械接触底物/终止液。

  质量控制‌:空白孔OD值应<0.2,标准曲线R²≥0.99。

  六、‌结果计算‌

  以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线,样本浓度通过曲线方程计算后乘以稀释倍数。

  注:以上资料仅供参考,如需更详细说明,可参考具体品牌商附带产品信息。

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