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豚鼠白介素-2(IL-2)Elisa试剂盒实验说明书

发表时间:2025/6/18  |  点击率:94
 
提 供 商: 天津天正信达生物科技有限公司 资料大小:
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  豚鼠白介素-2(IL-2)Elisa试剂盒实验说明书

  以下是天正信达豚鼠白介素-2(IL-2)ELISA试剂盒的实验说明书摘要,综合整理自多个来源:

  一、实验原理‌

  采用双抗体夹心法检测样本中IL-2浓度。包被抗体与样本中的IL-2结合后,依次加入生物素化抗体和HRP标记的链霉亲和素,最终通过TMB显色反应测定OD值,浓度与吸光度成正比。

  二、试剂盒组成‌

  预包被微孔板‌:96孔聚苯乙烯板(12孔×8条)

  标准品‌:冻干粉(2ng/瓶或160ng/L),需用稀释液重构

  检测试剂‌:

  酶标抗体工作液(HRP标记)

  生物素化抗体工作液

  辅助溶液‌:

  30×浓缩洗涤液(需1:20~1:30稀释)

  TMB显色液(A/B液分装)

  终止液(硫酸溶液)

  三、样本处理‌

  样本类型‌:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清、组织匀浆

  保存条件‌:

  短期:2-8℃保存48小时内检测

  长期:-20℃或-70℃冻存,避免反复冻融

  四、标准品稀释‌

  原倍标准品用1ml稀释液重构(如2ng/ml)

  梯度稀释:

  取8管,每管加稀释液300μl

  首管加入标准品后倍比稀释,第7管弃去300μl,第8管为空白对照

  五、实验步骤‌

  加样‌:

  标准品/样本每孔100μl,37℃孵育120分钟

  洗涤‌:弃液后加洗涤液,重复4-6次,拍干

  抗体孵育‌:

  加生物素化抗体100μl,37℃ 60分钟

  洗板后加酶标试剂50μl,37℃ 30分钟

  显色与终止‌:

  加TMB 100μl,避光反应15分钟

  加终止液50μl,15分钟内测450nm OD值

  六、注意事项‌

  温度控制‌:所有试剂使用前需平衡至室温(20-25℃)

  避免污染‌:

  不同试剂避免交叉污染

  勿使用含NaN3的样本(抑制HRP活性)

  数据计算‌:以标准曲线拟合浓度,乘以稀释倍数

  七、储存与有效期‌

  未开封试剂盒:2-8℃保存,有效期6个月

  开封后:微孔板需密封防潮,部分试剂需-20℃保存

  如需完整说明书,请联系供应商获取。

  注:以上资料仅供参考,不作为实际标准,具体请咨询技术老师。

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