豚鼠白介素-2(IL-2)Elisa试剂盒实验说明书 以下是天正信达豚鼠白介素-2(IL-2)ELISA试剂盒的实验说明书摘要,综合整理自多个来源: 一、实验原理 采用双抗体夹心法检测样本中IL-2浓度。包被抗体与样本中的IL-2结合后,依次加入生物素化抗体和HRP标记的链霉亲和素,最终通过TMB显色反应测定OD值,浓度与吸光度成正比。 二、试剂盒组成 预包被微孔板:96孔聚苯乙烯板(12孔×8条) 标准品:冻干粉(2ng/瓶或160ng/L),需用稀释液重构 检测试剂: 酶标抗体工作液(HRP标记) 生物素化抗体工作液 辅助溶液: 30×浓缩洗涤液(需1:20~1:30稀释) TMB显色液(A/B液分装) 终止液(硫酸溶液) 三、样本处理 样本类型:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清、组织匀浆 保存条件: 短期:2-8℃保存48小时内检测 长期:-20℃或-70℃冻存,避免反复冻融 四、标准品稀释 原倍标准品用1ml稀释液重构(如2ng/ml) 梯度稀释: 取8管,每管加稀释液300μl 首管加入标准品后倍比稀释,第7管弃去300μl,第8管为空白对照 五、实验步骤 加样: 标准品/样本每孔100μl,37℃孵育120分钟 洗涤:弃液后加洗涤液,重复4-6次,拍干 抗体孵育: 加生物素化抗体100μl,37℃ 60分钟 洗板后加酶标试剂50μl,37℃ 30分钟 显色与终止: 加TMB 100μl,避光反应15分钟 加终止液50μl,15分钟内测450nm OD值 六、注意事项 温度控制:所有试剂使用前需平衡至室温(20-25℃) 避免污染: 不同试剂避免交叉污染 勿使用含NaN3的样本(抑制HRP活性) 数据计算:以标准曲线拟合浓度,乘以稀释倍数 七、储存与有效期 未开封试剂盒:2-8℃保存,有效期6个月 开封后:微孔板需密封防潮,部分试剂需-20℃保存 如需完整说明书,请联系供应商获取。 注:以上资料仅供参考,不作为实际标准,具体请咨询技术老师。 天津天正信达供应:RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材,我司拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台,主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。 |