牛脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)Elisa试剂盒实验说明书 以下是天正信达牛脱氧核糖核酸酶I(DNase-I)ELISA试剂盒的标准化实验说明书，整合自多个厂商的规范操作流程： 一、实验原理 采用双抗体夹心法：预包被在微孔板上的牛DNase-I抗体捕获样本中的目标蛋白，与HRP标记的检测抗体形成复合物，经TMB显色后通过450nm吸光度定量。 二、试剂盒组成(96T/48T配置) 预包被酶标板：96孔或48孔(可拆卸) 标准品：0.781-50ng/mL梯度浓度(冻干粉或液体) 检测抗体：HRP标记的羊抗牛IgG 显色液：TMB底物A/B液 终止液：2M硫酸溶液 30×浓缩洗涤液：需用蒸馏水稀释 样本稀释液：PBS缓冲液(含蛋白稳定剂) 三、样本处理 血清/血浆： 采集后室温静置30分钟，3000g离心10分钟分离上清 避免溶血(溶血样本OD值可能偏高) 组织匀浆： 按重量体积比1:9加入PBS匀浆，3000g离心10分钟取上清 保存条件： 短期(1周内)可存于4℃，长期需分装冻存于-20℃(避免反复冻融) 四、操作步骤 试剂平衡：所有组分室温平衡30分钟(浓缩洗涤液需溶解) 加样孵育： 每孔加入50μL标准品/样本→50μL酶标试剂→37℃孵育60分钟 洗涤：弃液后拍干，每孔加满稀释洗涤液静置30秒，重复5次 显色：加入TMB A/B液各50μL，37℃避光反应15分钟 终止与检测：加终止液50μL，15分钟内测定450nm OD值(参考波长630nm) 五、注意事项 质量控制： 批内CV<10%，批间CV<12% 标准曲线R²应≥0.99 干扰因素： 避免使用NaN₃防腐剂(会抑制HRP活性) 显色液变蓝即终止，避免过度反应 安全提示：终止液具腐蚀性，需穿戴防护装备 六、结果计算 以标准品浓度为横坐标(对数坐标)、OD值为纵坐标绘制曲线，四参数拟合计算样本浓度。若样本OD值超出标准曲线范围，需用稀释液适当稀释后复测。 七、常见问题 高背景值：可能因洗涤不充分或样本脂质含量高，建议增加洗涤次数 低灵敏度：检查试剂保存条件(HRP标记抗体需避光-20℃保存) 注：以上资料仅供参考，不作为实际标准，不同品牌试剂盒可能存在参数差异，请以实际说明书为准，具体请咨询技术老师。 天津天正信达供应：RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材，我司拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台，主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。 | 
