以下是关于大鼠4-羟基雌二醇(4-OH-E2)试剂盒的实验说明书核心内容整理: 一、实验原理 采用双抗体夹心法检测样本中4-OH-E2含量: 包被抗体的微孔板捕获样本中的4-OH-E2,形成固相抗体-抗原复合物; 加入HRP标记的抗体后,复合物与酶标抗体结合,经洗涤后加TMB显色; 颜色深浅与4-OH-E2浓度正相关,450nm波长下测定OD值。 二、试剂盒组成 组分 规格 用途 酶标包被板 12孔×8条 固相抗体载体 标准品(400ng/L) 0.5ml/瓶 绘制标准曲线 酶标试剂 6ml/瓶 HRP标记抗体 显色剂(TMB A/B液) 各6ml/瓶 显色反应 终止液 6ml/瓶 终止显色反应 三、样本处理要求 血清/血浆:EDTA抗凝血浆需5,000×g离心15分钟(4℃),分离后-80℃保存; 稀释要求:样本需用试剂盒提供的稀释液按1:5比例稀释(如10μl样本+40μl稀释液); 禁忌:含NaN3的样本会抑制HRP活性,需避免使用。 四、操作步骤 标准品稀释:将原倍标准品按梯度稀释至12.5-200ng/L; 加样:标准孔加50μl标准品,样本孔先加40μl稀释液,再加10μl样本; 温育:37℃孵育30分钟,洗涤5次; 显色:加入TMB A/B液各50μl,37℃避光显色15分钟; 终止与检测:加终止液50μl,15分钟内测定450nm OD值。 五、注意事项 重复冻融:样本避免反复冻融,-20℃保存需分装; 洗板:手工洗板需防止交叉污染,自动洗板机建议增加30秒浸泡步骤; 显色控制:TMB若变蓝则失效,终止后黄色需及时检测。 六、性能参数 灵敏度:<10pg/ml; 精密度:板内/板间变异系数<15%; 有效期:6个月(2-8℃避光保存)。 如需完整说明书,可下载原始文档或联系供应商。 注:以上资料仅供参考,不同品牌产品可能存在设计差异,操作前建议参考说明书。 天津天正信达供应:RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材,我司拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台,主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。 |