以下是为您整理的犬白介素18(IL-18)ELISA试剂盒实验使用说明书，内容涵盖实验原理、操作流程及注意事项。 犬白介素18(IL-18)ELISA试剂盒采用双抗体夹心法原理进行检测。其核心机制是通过特异性抗体与目标抗原的结合反应实现定量分析。具体过程包括：首先将抗犬IL-18的捕获抗体包被于微孔板表面形成固相载体;随后加入待测样本，样本中的IL-18会与固相抗体特异性结合;再加入酶标记的检测抗体，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物;通过底物显色反应(如TMB)，在HRP酶催化下产生颜色变化，其显色强度与样本中IL-18浓度呈正相关。该技术具有高灵敏度(可检测pg/mL级别蛋白)和强特异性(双抗体设计有效排除交叉反应)的特点，适用于血清、血浆、组织匀浆等多种样本中IL-18的定量。 BS-4413 犬白介素18(IL-18)ELISA试剂盒 实验操作流程 样本准备 血清/血浆：使用无热原试管采集，EDTA或肝素抗凝，3000 rpm离心10分钟取上清。 组织匀浆：按重量加入PBS(pH 7.4)匀浆，3000 rpm离心10分钟取上清。 保存条件：短期(48小时内)2-8℃保存，长期需-20℃分装，避免反复冻融。 试剂配制 洗涤液：浓缩洗涤液按1:20比例用蒸馏水稀释。 标准品：用标准品稀释液梯度稀释(如125-8000 pg/mL范围)。 检测步骤 加样：每孔加入50μL标准品或样本，37℃孵育30分钟。 洗涤：弃去液体，用洗涤液洗板5次，拍干。 酶标抗体：每孔加入50μL酶标检测抗体，37℃孵育30分钟。 显色：加入TMB底物液50μL，避光孵育15分钟。 终止：每孔加入50μL终止液，立即测定OD值(450nm)。 结果计算 通过标准曲线拟合，根据样本OD值计算IL-18浓度。 注意事项 仪器要求：需配备450nm酶标仪及精准加样器(0.5-1000μL)。 操作规范：避免气泡干扰，孵育时用封板膜密封微孔。 质控建议：每批次实验需设置空白孔和重复孔以确保数据可靠性。 以上内容详细说明了犬IL-18 ELISA试剂盒的操作规范，如需进一步优化实验方案或补充其他物种的检测方法，可提供具体需求。 注意：以上仅供参考，实验需严格遵循试剂盒说明书，避免交叉污染，并确保样本处理(如离心、稀释)符合要求。 | 
