犬α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒实验使用说明书 本生犬α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒实验使用说明书，包含操作流程、注意事项及关键参数说明。 一、试剂盒组成 预包被酶标板：96孔/48孔，已包被抗IFN-α抗体 标准品：冻干粉，需用标准品稀释液复配(梯度稀释范围：15.6-1000 ng/mL) 检测抗体：生物素化抗IFN-α抗体(100×浓缩液) 显色系统：TMB底物A/B液(避光保存)、终止液(2M H₂SO₄) 其他：20×浓缩洗涤液、封板膜、说明书 二、实验操作流程 1. 样本准备 血清/血浆：采集后离心(3000 rpm, 10 min)，避免溶血，2-8℃保存≤48小时，长期保存需-20℃/-80℃(避免反复冻融) 组织/细胞上清：离心去沉淀，蛋白定量后稀释至检测范围内^^2^^ 2. 洗涤液配置 按1:19比例用蒸馏水稀释浓缩洗涤液(如1mL浓缩液+19mL水)，现配现用^^1^^2^^ 3. 检测步骤 步骤操作要点时间/温度 加样标准品/样本各100μL/孔，空白孔加稀释液37℃ 90min 洗涤甩干后每孔加350μL洗涤液，重复3次，拍干室温 加抗体每孔加100μL生物素化抗体(1:100稀释)37℃ 60min 加酶标物每孔加100μL SABC复合物37℃ 30min 显色每孔加90μL TMB底物(避光)37℃ 15min 终止每孔加50μL终止液立即读数 三、关键注意事项 安全防护： 终止液具腐蚀性，需戴手套操作;避免底物B接触皮肤 实验区禁止饮食，使用一次性吸头防止交叉污染 操作规范： 加样顺序一致，确保温育时间误差≤5分钟 显色后10分钟内测定OD值(450nm波长) 数据解析： 标准曲线R²需≥0.99，样本浓度超出范围需重新稀释 四、常见问题处理 高背景值：检查洗涤是否，避免吸水纸残留液体 显色异常：确认TMB底物是否避光保存，终止液是否按比例添加 标准曲线偏差：复溶标准品时需充分涡旋混匀 注意：以上仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒 天津天正信达供应：RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材，我司拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台，主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。 | 
