人层粘连蛋白α3(lama3)ELISA试剂盒实验使用说明书 以下是为您整理的人层粘连蛋白α3(LAMA3)ELISA试剂盒实验使用说明书核心内容: 一、实验原理 采用双抗体夹心法酶联免疫吸附技术(ELISA)。预包被抗LAMA3抗体的微孔板中依次加入样本、标准品及HRP标记检测抗体,形成抗体-抗原-抗体复合物。TMB显色后,450nm波长测定吸光度,浓度与OD值呈正相关。 二、试剂盒组成 组分 规格(96T) 保存条件 预包被抗LAMA3抗体微孔板 12×8条 2-8℃ 重组LAMA3标准品 10ng/管×2管 -20℃冻存 生物素标记检测抗体 100μL(100×) 避光 亲和素-HRP复合物 100μL(100×) 避光 TMB显色液 A/B各10mL 2-8℃避光 20×洗涤缓冲液 20mL 室温 注:具体配置以实际产品批号说明书为准。 三、样本处理 血清/血浆:室温静置2h后离心(1000×g, 15min),取上清检测。 组织匀浆:PBS冲洗后冰上研磨,超声破碎后5000×g离心5min取上清。 细胞培养上清:直接离心(1000×g, 10min)去除杂质。 禁忌:溶血或反复冻融样本需弃用。 四、操作流程 平衡:试剂盒室温平衡30min。 加样:标准品/样本各100μL,空白孔加稀释液。 孵育:37℃ 90min→洗涤3次(每次30s)。 显色:避光加入TMB,37℃ 15min→终止液终止。 检测:450nm测定OD值,600nm校正。 五、注意事项 移液精度:使用校准移液枪(误差≤2%),避免交叉污染。 温度控制:试剂需平衡至室温,禁止水浴加热。 避光操作:TMB显色全程避光,孵育时覆盖酶标板。 批次一致性:不同批次试剂不可混用。 注:仅供科研使用,以上资料供参考,如需具体产品说明请咨询技术老师或品牌供应商。 |