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生化检测试剂盒
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以下是天正信达人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)试剂盒 的标准化实验操作流程及关键注意事项:
BS-0099 人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒
一、检测原理
采用 双抗体夹心法:
预包被抗人PDGF-A抗体的微孔板捕获样本中的PDGF-AB
标记的抗PDGF-B抗体与复合物结合,形成“抗体-抗原-酶标抗体"三明治结构
HRP催化TMB显色,450nm波长测定OD值,浓度与吸光度正相关
二、试剂盒核心参数
项目 规格
检测范围 31.2-2000pg/mL(部分品牌0.33-50ng/mL)
灵敏度 ≤2pg/mL 或 0.33ng/mL
样本类型 血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清、组织匀浆
板间变异 CV<10%
回收率 83-108%(血清/血浆/细胞上清)
三、实验步骤
1. 样本预处理
血清/血浆:2500rpm离心20分钟,避免溶血或脂血
组织样本:PBS匀浆后1000×g离心10分钟取上清
保存:-20℃分装,避免反复冻融(≤3次)
2. 标准品配制
冻干标准品用1mL稀释液复溶,梯度稀释至7个浓度(如2000→31.2pg/mL)
3. 检测流程
加样:标准品/样本50μL/孔,空白孔加稀释液
孵育:37℃ 120分钟→洗涤6次
加酶标抗体:100μL/孔,37℃ 60分钟→洗涤6次
显色:TMB 100μL/孔,避光反应15分钟
终止:2M硫酸100μL/孔,5秒内混匀
读值:450nm主波长,630nm参比波长
四、关键注意事项
质量控制
每板需设空白孔、标准曲线孔和质控孔
复溶标准品需充分混匀,避免气泡
操作规范
洗涤时需扣干残液,避免交叉污染
加样避免触及孔壁,防止非特异吸附
数据解读
标准曲线R²应≥0.99,否则需重复实验
样本OD值超出标准曲线时需稀释复测
五、常见问题处理
边缘效应:预温育板条至37℃可消除外周孔显色差异
显色异常:检查TMB是否避光保存,HRP是否失活
注:不同品牌试剂盒组分可能差异(如预包被板/冻干抗体),需严格按说明书操作。
人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)试剂盒 天津天正信达供应:RNA逆转录试剂盒、逆转录试剂盒、PCR试剂盒 、提取试剂盒、色谱进样瓶、培养基瓶、试剂瓶、胎牛血清、染色液、试剂瓶、QPCR试剂盒、生物试剂、抗体、琼脂糖、实验耗材,我司拥有一支覆盖生物化学、分子生物学、免疫学等专业人员的研发、构建了仪器设备齐全的实验技术平台,主要包括AKTA、高压均质机、全波长酶标仪、高速落地离心机和qPCR仪等大型仪器设备。
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