配制培养基培养液时需注意的事项
以下是天正信达配制培养基/培养液时的关键注意事项,综合实验操作规范与质量控制要点:
一、基础配制原则
物料核对
确认培养基成分名称、批号及有效期,避免误用过期或变质原料。
水质要求
使用电导率≤25 μS/cm的三蒸水或超纯水,避免矿物离子干扰。
二、操作流程控制
溶解与分装
含琼脂培养基需煮沸4-6次至溶解,分装体积不超过容器容量的80%。
难溶成分(如淀粉)需先用冷水调匀,再加热溶解。
pH调节
溶解冷却至室温后调pH,高压灭菌后pH会下降0.1-0.2,需预先补偿。
动物细胞培养液常用pH 7.2-7.4(酚红指示鲜红色)。
三、灭菌与保存
灭菌规范
含糖培养基避免121℃长时间灭菌(易焦化),建议115℃ 15-20分钟。
已添加血清或抗生素的培养基需过滤除菌(0.22 μm滤膜)。
储存条件
灭菌后培养基4℃保存≤1周,琼脂培养基反复熔化不超过3次。
四、特殊成分处理
成分类型 注意事项
血清 解冻后56℃ 30分钟灭活,避免反复冻融
热敏感添加剂 待培养基冷却至50℃时加入(如抗生素)
指示剂/染料 pH校正后再添加,避免高温破坏活性
五、质控要点
无菌检查
每批次培养基需做空白对照,观察是否有杂菌污染。
性能验证
动物细胞培养液配制后静置30分钟,检查是否有沉淀析出。
通过上述措施可显著提升培养基的稳定性和可靠性,具体参数需根据培养对象(细菌、细胞或真菌)调整。
注:以上资料仅供参考,不作为实际标准,具体请咨询技术老师。
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