标签：Elisa 本生试剂盒 标准品 抗体 封板膜 一次性吸头 大鼠试剂盒
以下是天正信达关于大鼠ELISA试剂盒加样实验常见问题的解答及解决方案：
一、加样不准确问题
移液器校准不当
需定期用标准砝码校准移液器，特别是小体积加样(如5-10μL)。
加样时吸头需垂直插入液体，缓慢匀速操作，避免气泡产生。
加样时间过长
单次加样时间控制在10分钟内，样本较多时分批操作。
使用多道移液器可提高效率，减少孔间差异。
液体残留或溅洒
加样后检查孔壁是否残留液体，用吸水纸轻拭酶标板表面。
加酶试剂时避免快速操作，防止液体溅出孔外。
二、样本处理问题
血清/血浆样本
血清需静置1-2小时后离心(3000rpm，15分钟);血浆需采血后立即混匀抗凝剂再离心。
溶血或脂血样本需离心后取上清，避免血红蛋白干扰。
样本保存不当
短期存放于2-8℃，长期保存需-20℃以下，避免反复冻融。
三、实验操作问题
孵育条件不稳定
温育时使用恒温箱(37℃±0.5℃)，避免温度波动。
封板膜需一次性使用，防止蒸发和污染。
洗涤不净
每孔注满洗涤液，静置30秒后弃去，重复4-6次，最后拍干。
自动洗板机需检查管路是否堵塞。
显色异常
TMB显色需避光，反应时间控制在15-30分钟，及时终止。
若显色过弱，检查酶标抗体活性或延长孵育时间。
四、质量控制建议
设置对照
必须包含空白孔、阴性对照和阳性对照，验证实验有效性。
重复性差处理
复孔加样需使用同一移液器，保持操作一致性。
板内变异系数应<15%，否则需排查加样或洗涤问题。
五、其他注意事项
试剂污染：避免使用含NaN3的缓冲液(抑制HRP活性)。
环境控制：操作台需清洁，移液器吸头一次性使用。
具体问题可结合试剂盒说明书调整。
注：以上资料仅供参考，不作为实际标准，具体请咨询技术老师。
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