如何选择符合实验要求的ELISA试剂盒?

　　标签：Elisa 本生试剂盒 标准品 抗体 封板膜 一次性吸头 大鼠试剂盒

　　以下是天正信达选择符合实验要求的ELISA试剂盒的系统性指南，涵盖关键筛选维度和实操建议：

　　一、明确实验核心需求‌

　　靶标与物种匹配‌

　　确认目标蛋白名称(如IL-6、TNF-α)及物种(人/大鼠/小鼠等)，避免跨物种交叉反应。

　　特殊样本(如脑脊液、唾液)需选择已验证兼容性的试剂盒。

　　样本类型适配‌

　　血清/血浆：选择抗溶血、抗脂血干扰优化的试剂盒。

　　细胞上清：注意培养基成分(如高浓度BSA)是否干扰检测。

　　组织裂解液：需验证裂解缓冲液与试剂盒兼容性。

　　检测类型选择‌

　　双抗体夹心法‌：适用于大分子蛋白(>10kDa)，灵敏度高。

　　竞争法‌：适合小分子(如激素、代谢物)检测。

　　二、性能参数评估‌

　　灵敏度与线性范围‌

　　低丰度蛋白(如pg/mL级)需高灵敏度试剂盒。

　　确保样本浓度落在标准曲线范围内，避免多次稀释。

　　重复性与稳定性‌

　　批内/批间变异系数(CV)应<15%，优选CV<10%的产品。

　　验证试剂盒开瓶稳定性(如4℃保存1周是否可用)。

　　抗体对验证‌

　　优先选择双单抗或经Western Blot/质谱验证的抗体。

　　交叉反应率(CR)应<10%，高特异性试剂盒CR可<1%。

　　四、避坑指南‌

　　避免常见错误‌

　　不同批号试剂混用(洗涤液和终止液除外)。

　　未阅读说明书直接操作，忽略特殊样本处理要求。

　　质控红线‌

　　标准曲线R²<0.99或阳性对照OD值异常时需重做。

　　选择时建议横向对比3-5家品牌，结合文献和预实验数据决策。

　　ELISA试剂盒在选购时应注意以下几个方面：

　　1、明确研究种属：一般来说，厂家都会在产品名称上标明种属。

　　2、明确样本类型：不同厂家验证样本类型不同，即使同一厂家不同试剂盒，其验证样本类型也不尽相同。特别是复杂的血浆样本，因此购买前需仔细核对。

　　3、会预测自己的目标因子的浓度：一般来说，待测因子可以根据经验或资料获得参考的检测范围，且正常人与疾病状态存在差异。因而，必要时进行样本的稀释及选择合适检测范围的试剂盒极其重要。

　　4、检查试剂盒进行过哪些质控：质控数据在说明书中即可找到，在购买前检查试剂盒是否进行过严格的质控实验，包括批次内(Intra-Assay)及批次间(Inter-Assay)、掺入回收实验、线性稀释实验及交叉反应测试等，每个数据最好都看一下，确保的结果重现性及准确性。

　　5、需检测的因子数量：如果待测因子超过 5 个，且样本量较小时，单因子 ELISA 检测方法并不是好的选择。建议考虑多因子检测方法，可节约样本及时间成本，也可保证检测结果准确。

　　注：以上资料仅供参考，不作为实际标准，具体请咨询技术老师。

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