大鼠神经纤维网蛋白2(NRP2)ELISA试剂盒操作注意事项
以下是关于大鼠神经纤维网蛋白2(NRP2)ELISA试剂盒操作的注意事项,天正信达结合相关文献和实验规范整理:
一、试剂盒使用前准备
平衡与检查
试剂盒从冷藏环境取出后需室温平衡15-30分钟,避免温差影响反应稳定性。
检查试剂组分是否齐全,不同批次试剂禁止混用。
样本处理
样本避免反复冻融(建议分装保存),-80℃长期保存不超过12个月。
溶血或浑浊样本需离心澄清(10,000×g 5分钟)后再检测。
二、实验操作关键步骤
加样规范
使用校准后的移液器,加样时间控制在5分钟内(多样本推荐排枪操作)。
加样时枪头悬空至孔底,避免触碰孔壁或产生气泡。
孵育与洗涤
孵育时覆盖封板膜,37℃避光环境反应,避免蒸发或温度不均。
洗涤液需含0.05% Tween-20,拍干时避免滤纸直接接触反应孔。
三、常见问题处理
显色异常
无显色:检查底物是否避光保存或酶标抗体是否失效。
高背景:增加封闭时间(1-2小时)或洗涤次数(≥5次)。
标准曲线异常
标准品需梯度稀释(如5倍稀释),确保R²≥0.99。
四、安全与质控
废弃物处理
所有接触样本的耗材需按生物危害物处理。
质控建议
每批次实验设置复孔,质控孔置于酶标板中央以减少边缘效应。
注:具体操作请以试剂盒说明书为准,不同品牌可能存在差异。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 ELISA试剂盒
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