elisa试剂盒组成及常见分类有哪些ELISA试剂盒的组成
ELISA试剂盒的核心组件包括以下部分:
包被板(微孔板)
96孔或384孔聚苯乙烯板,预包被抗原或抗体,用于捕获目标分子。
部分试剂盒使用滤膜或特殊涂层增强吸附性能。
标准品
已知浓度的目标分子(如抗原/抗体),用于绘制标准曲线。
需避免反复冻融,稀释时使用低吸附EP管。
检测抗体
酶标记抗体(如HRP/ALP标记),通过催化底物显色实现信号放大。
部分试剂盒提供生物素化抗体+链霉亲和素-酶复合物(双抗夹心法)。
酶底物
常用TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)或OPD(邻苯二胺),显色后通过酶标仪读数。
缓冲液与洗涤液
封闭液(如BSA)减少非特异性结合,洗涤液(含Tween-20)清除未结合物质。
终止液
硫酸或盐酸溶液,终止显色反应并稳定信号。
ELISA试剂盒的常见分类
按检测目标分类
抗原检测:包被抗体捕获样本中的抗原,适用于病原体或细胞因子检测。
抗体检测:包被抗原捕获样本中的抗体,用于血清学诊断。
按方法学分类
双抗夹心法:高特异性,需两种抗体(捕获+检测),适用于大分子抗原。
竞争法:样本抗原与标记抗原竞争结合抗体,适用于小分子。
间接法:检测一抗后加酶标二抗,灵敏度高但易受干扰。
按种属分类
人、小鼠、大鼠、兔等种属特异性试剂盒,避免交叉反应。
特殊类型
磷酸化特异性ELISA:检测蛋白磷酸化状态。
多重检测试剂盒:可同时分析多种目标分子(如细胞因子组合)。
注意事项
试剂盒需2-8℃保存,避免反复冻融。
不同批次试剂禁止混用,标准品需现配现用。
注意:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 Elisa试剂盒
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