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ELISA试剂盒常见问题及预防措施

更新时间:2025-12-05  |  点击率:24

       标签:ELISA试剂盒  天正信达试剂盒 生物试剂 酶标板 吸头 标准品


  ELISA试剂盒常见问题及预防措施

  一、ELISA操作流程技术要点

  加样细节‌:

  使用专用加样器,避免气泡产生,枪头不可触及孔壁‌。

  不同试剂更换吸头,防止交叉污染‌。

  加样量需准确,避免孔间不一致。

  孵育控制‌:

  严格按说明书温度(通常37℃)和时间(如1小时)孵育,避免温度波动‌。

  孵育期间确保酶标板平放,避免液体溢出‌。

  洗涤性‌:

  洗涤液现用现配,每孔注满洗涤液,浸泡时间一致(30-60秒)‌。

  甩板时快速翻转120-150度,避免残留液体污染相邻孔‌。

  样本处理‌:

  避免溶血和反复冻融,分装后-20℃或-70℃保存。

  混匀时轻柔颠倒,避免剧烈振荡。

  试剂保存‌:

  试剂盒4℃-8℃冷藏,避免冷冻;使用前室温回温40-60分钟‌。

  标准品分装后-20℃保存,严禁反复冻融‌。

  二、常见问题及预防措施

  背景颜色深/非特异性染色‌:

  原因:洗涤不充分、试剂污染、显色时间过长‌。

  措施:严格洗涤步骤,更换吸头,控制显色时间‌。

  所有孔均无明显颜色‌:

  原因:试剂混淆、酶标物失活、遗漏步骤‌。

  措施:核对试剂标签,检查有效期,按流程操作‌。

  标准曲线不佳‌:

  原因:标准品配制错误、储存不当、稀释过早‌。

  措施:现配现用,避免室温放置过久,按说明书稀释‌。

  重复性差‌:

  原因:加样不准、孔间污染、仪器问题。

  措施:校准加样器,避免交叉污染,定期维护仪器。

  注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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