人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒天津天正信达供应 核酸染料是一种超灵敏、极其稳定且对环境安全的荧光核酸染料，可替代剧毒的溴化乙锭 (EB)， 核酸染料是一种的油性大分子，不能穿透细胞膜进入细胞内。

　　以下是 天正信达人胰岛素样生长因子1(IGF-1) ELISA试剂盒‌ 的标准化使用说明及操作指南：

　　BS-0032 人胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒

　　一、检测原理

　　采用 ‌双抗体夹心法‌：

　　预包被抗人IGF-1抗体的微孔板捕获样本中的目标蛋白

　　加入标记的二抗与靶蛋白结合，形成“抗体-抗原-酶标抗体"复合物

　　HRP催化TMB显色，450nm波长测定OD值，浓度与吸光度呈正相关

　　二、核心参数

　　项目‌ ‌规格‌

　　检测范围‌ 62.5-4000pg/mL(部分品牌31.25-2000pg/mL)

　　灵敏度‌ ≤15.35pg/mL 或 18.75pg/mL

　　样本类型‌ 血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、细胞培养上清、组织匀浆

　　变异系数‌ 板内/板间CV均<10%

　　回收率‌ 83-108%(血清/血浆)

　　三、试剂盒组成

　　预包被微孔板‌：96孔(透明或白色)

　　冻干标准品‌：通常含1瓶(400ng/mL或6000pg/mL起始)

　　检测抗体‌：标记抗IGF-1抗体

　　显色系统‌：TMB底物A/B液、终止液(2M硫酸)

　　浓缩洗涤液‌：需1:25稀释使用

　　四、实验步骤

　　1. ‌样本预处理‌

　　血清/血浆‌：室温静置20分钟后，2000-3000rpm离心20分钟取上清

　　组织匀浆‌：PBS(pH7.4)按1:9重量比匀浆，离心取上清

　　保存条件‌：-20℃分装，避免反复冻融(≤3次)

　　2. ‌标准曲线制备‌

　　冻干标准品复溶后梯度稀释(如6000→93.75pg/mL)

　　3. ‌检测流程‌

　　加样：标准品/样本100μL/孔，37℃孵育120分钟

　　洗涤：扣干残液，洗板3-6次(每次浸泡1-2分钟)

　　加酶标抗体：100μL/孔，37℃ 60分钟

　　显色：TMB避光反应15分钟→终止液终止

　　读值：450nm主波长，630nm参比

　　五、注意事项

　　质量控制‌

　　每板需设空白孔和标准曲线孔(R²≥0.99)

　　样本OD值超出范围需稀释复测

　　操作规范‌

　　试剂使用前需平衡至室温(20-25℃)

　　避免底物接触金属离子或强光

　　数据解读‌

　　建议使用四参数拟合(4PL)计算浓度

　　六、常见问题

　　显色异常‌：检查TMB是否避光保存，HRP是否失活

　　边缘效应‌：预温育板条至37℃可减少孔间差异

　　注：不同品牌组分可能差异(如预包被板/冻干抗体)，需严格按说明书操作，以上资料仅供参考，具体请咨询技术老师或是供应商。

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