RNA逆转录实验常见问题及解决方案1.‌RNA模板降解‌问题‌：RNA易被RNase降解，导致cDNA合成失败或产量低。解决方案‌：全程冰上操作，使用RNase-free耗材(如枪头、离心管)‌。加入RNase抑制剂(如RiboLock)保护RNA‌。通过琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性(28S/18S条带比例应为2:1)‌。2.‌RNA定量不准确‌问题‌：R...

RNA逆转录试剂盒操作步骤及实验原理RNA逆转录实验原理RNA逆转录是通过逆转录酶将RNA模板(如mRNA)转化为互补DNA(cDNA)的过程，其核心原理是逆转录酶以RNA为模板，在引物(如OligodT或随机引物)引导下合成cDNA链‌。该技术广泛应用于基因表达分析、病毒检测等领域，其关键步骤包括：引物结合‌：OligodT引物结合mRNA的Poly(A)...

竞争ELISA测抗体亲和力实验流程一、实验原理竞争ELISA通过待测抗体与酶标抗原竞争结合固相抗原，显色信号强度与抗体浓度成反比，适用于小分子抗原或半抗原的检测‌。二、实验步骤试剂与样本准备‌标准品倍比稀释(如S1-S7)，待测样本平衡至室温‌。特异性抗体稀释为工作液(如1:100)，确保仅识别目标抗原‌。竞争反应‌将样本与抗体工作液加入包被抗原的酶标板，3...

ELISA试剂盒能否只做一次标准曲线?一、标准曲线需每次实验重新制作实验条件差异影响结果‌每次实验的孵育时间、温度、洗涤次数等条件可能存在微小差异，导致标准曲线不可复用‌。若多次实验共用同一标曲，可能因批次间试剂活性变化(如酶标抗体效价下降)引入误差‌。试剂盒说明书要求‌多数ELISA试剂盒明确要求每次实验需重新绘制标准曲线，以确保数据准确性‌。二、特殊情况...

如何预防ELISA实验样本处理错误?一、样本采集与保存规范抗凝剂选择与处理‌使用EDTA抗凝血浆时需立即颠倒混匀5-8次，避免局部凝血‌。避免使用肝素钠(可能干扰抗原-抗体结合)或含叠氮钠的保存液(抑制HRP酶活性)‌。保存条件优化‌短期检测(≤7天)样本可4℃保存，长期需分装后-80℃冻存，避免反复冻融(3次)导致蛋白降解‌。组织样本需加入蛋白酶抑制剂(如...

病理切片盒的分类有哪些病理切片盒的分类病理切片盒根据用途、材质和存储对象可分为以下几类：按用途分类‌诊断性切片盒‌：用于存放手术切除或活检的病理切片，支持常规HE染色和免疫组化分析‌。研究性切片盒‌：存放实验动物或组织库样本，适用于特殊染色和分子生物学研究‌。术中快速切片盒‌：专为术中快速病理诊断设计，需快速存取和标识‌。按存储对象分类‌蜡块盒‌：存放未切片...

一次性超低吸附细胞培养板一次性超低吸附细胞培养板通过表面共价结合水凝胶或特殊聚合物涂层，显著降低细胞贴附、蛋白吸附及酶活性，适用于3D细胞培养(如类器官、球状体)及悬浮细胞研究‌。主要规格与分类孔数选择‌6孔板‌：单孔生长面积9.5cm²，工作体积1.9-2.9mL。96孔板‌：平底/U底/V底/M底可选，U底适合球体形成。384孔板‌：高通量筛选专用，透明...

倒置培养皿的注意事项有哪些?培养基凝固后再倒置‌需等待琼脂凝固(约30分钟)，避免未凝固时倒置导致培养基变形或与皿底分离‌。若培养基未凝固即倒置，可能因重力作用导致厚度不均或边缘开裂‌。保持水平放置‌倒置后需确保培养皿水平放置，防止培养基接触皿盖影响菌落生长或冷凝水滴落污染‌。控制冷凝水量‌若冷凝水过多(如倾注温度过高导致)，需在无菌条件下吹干表面水分，避免...

ELISA试剂盒竞争法操作的步骤与注意事项以下是ELISA竞争法操作的标准化步骤及关键注意事项，结合实验规范与常见问题解决方案整理：一、操作步骤‌试剂与样本准备‌标准品按说明书要求进行倍比稀释(如5倍梯度稀释)，避免涡旋震荡导致蛋白变性‌。样本需离心澄清(10,000×g5分钟)，避免溶血或细菌污染干扰结果‌。竞争反应‌将样本与预稀释的特异性抗体工作液混合(...

大鼠神经纤维网蛋白2(NRP2)ELISA试剂盒操作注意事项以下是关于大鼠神经纤维网蛋白2(NRP2)ELISA试剂盒操作的注意事项，天正信达结合相关文献和实验规范整理：一、试剂盒使用前准备‌平衡与检查‌试剂盒从冷藏环境取出后需室温平衡15-30分钟，避免温差影响反应稳定性‌。检查试剂组分是否齐全，不同批次试剂禁止混用‌。样本处理‌样本避免反复冻融(建议分装...

小鼠尿素氮(BUN)ELISA试剂盒解析实验原理实验试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被小鼠尿素氮(BUN)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠尿素氮(BUN)呈正相关。...

悬浮细胞培养的正确方法以下是悬浮细胞培养的标准化操作流程及关键注意事项，天正信达结合多个可靠来源整理：一、培养前准备‌器材选择‌推荐使用T25培养瓶或10cm培养皿(初期扩增)，后期可转至通气旋转瓶‌。确保容器无菌，避免使用未处理玻璃器皿(易导致细胞团聚)‌。培养基与血清‌选择适配细胞类型的培养基(如DMEM高糖用于293T细胞)‌。胎牛血清浓度建议5-20...

以下是胎牛血清使用中的常见问题及处理方法，天正信达综合多个可靠来源整理：一、储存与解冻规范‌长期储存条件‌未拆封血清应存放于-20℃(短期可-80℃)，避免反复冻融‌。分装时预留10%体积空间(冻融后体积膨胀)‌。解冻方法‌程序性解冻‌：从-20℃移至4℃冰箱过夜，再室温摇匀至溶解‌。禁忌‌：禁止直接37℃水浴或高温解冻(易致蛋白变性沉淀)‌。二、沉淀问题与...

以下是关于酶联免疫吸附实验(ELISA)技术服务的综合说明，结合相关技术规范与临床应用整理：一、ELISA技术原理与类型‌核心原理‌通过抗原/抗体特异性结合固相载体(如聚苯乙烯微孔板)，利用酶标记物催化底物显色，实现定性或定量检测‌。常用方法包括：双抗体夹心法‌：检测大分子抗原(如细胞因子)‌。竞争法‌：适用于小分子物质(如激素、药物残留)‌。技术优势‌灵敏...

以下是ELISA样本分装避免反复冻融的规范操作指南，结合不同样本类型和保存条件进行说明：一、分装基本原则‌单次用量分装‌根据实验需求预估单次用量(如50-100μL/管)，分装至无菌EP管或冻存管中‌。推荐使用带螺旋盖的冻存管(如1.5mL/2mL规格)，避免密封不严导致样本蒸发或污染‌。标记规范‌标注样本编号、日期、浓度(如适用)及冻融次数(初始标记为0次...