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琼脂糖凝胶回收DNA片段的核心原则
2025-09-25
琼脂糖凝胶回收DNA片段的核心原则选择性分离:通过电泳分离目标DNA条带后,需精确切取含目的片段的凝胶区域,避免污染或损失。高效吸附与洗脱:利用硅基质膜或离心柱特异性结合DNA,通过缓冲液梯度洗脱实现纯化。最小化损伤:紫外照射时间需严格控制(关键操作步骤与注意事项1.电泳与切胶凝胶浓度选择:大片段(1kb)用0.5%-1%琼脂糖,小片段(切胶...
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琼脂糖核酸电泳操作步骤详解
2025-09-25
琼脂糖核酸电泳操作步骤详解1.实验前准备仪器检查:确认电泳仪电源、电压调节旋钮及电极连接正常,凝胶成像系统光源和软件功能完好。试剂配制:根据DNA片段大小选择琼脂糖浓度(0.5%-2%),如大片段(1kb)用0.5%-1%,小片段(缓冲液常用TAE或TBE,需检查pH值(TAE为8.0,TBE为8.3)及是否变质。安全防护:佩戴手套,避免接触溴...
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液相色谱用试剂盒的检测对象及应用领域
2025-09-24
液相色谱用试剂盒的检测对象及应用领域液相色谱(HPLC)及其联用技术(如LC-MS/MS)的试剂盒广泛应用于复杂样品的分离与检测,其核心检测对象包括以下几类:1.小分子化合物代谢物:如葡萄糖、胆固醇、氨基酸等,用于生理生化分析。药物及代谢产物:包括药物浓度监测、代谢研究(如儿茶酚胺类物质)。环境污染物:土壤/水体中的有机污染物(如农药残留、重金...
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台盼蓝染色液资料详解
2025-09-24
台盼蓝染色液资料详解台盼蓝染色液概述台盼蓝(TrypanBlue)是一种细胞活性染料,化学式为C₃₄H₂₄N₆Na₄O₁₄S₄,分子量960.805,CAS号72-57-1,呈蓝灰色粉末状,溶于水,微溶于乙醇。其核心功能是通过染色区分活细胞与死细胞:活细胞因膜结构完整而拒染,死细胞因膜通透性增加被染成蓝色。主要用途细胞活性检测:用于细胞培养中存活率评估...
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优级胎牛血清的核心指标解析
2025-09-23
优级胎牛血清作为细胞培养的关键原料,其核心指标需严格满足细胞生长需求并确保实验安全性,具体解析如下:一、理化性质指标:细胞生长的“基础环境”1.pH值(6.7-8.2)-维持细胞代谢酶活性,pH异常会导致细胞形态改变甚至死亡。-优级血清通常控制在7.0-7.5,接近细胞内环境。2.渗透压(260-340mOsm/kg)-防止细胞因渗透压失衡而肿胀或缩小。-渗...
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ABI/梯度PCR仪适配pcr八联管,半/全裙边96孔板
2025-09-23
罗氏480II用96孔板384孔板及封板膜50ml斜口密封盖灭菌细胞培养瓶2ml5mlEP管无DNA酶/RNA酶无菌离心管小鼠丙氨酸氨基转移酶试剂盒(ALT)ELISAKIT培养基瓶的类型及特点材质分类PETG/PET材质:轻便防碎,耐低温(-40℃),适合运输和储存培养基、血清。高硼硅玻璃:耐高温高压,透明度高,但易碎,需谨慎操作。PC材质:耐...
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PCR试剂盒的主要类型及特点
2025-09-23
PCR试剂盒的主要类型及特点1.荧光定量PCR(qPCR)试剂盒特点:预混SYBRGreen或探针荧光染料,实时监测扩增信号,适用于绝对/相对定量分析。应用:基因表达分析、病毒载量检测(如新冠、流感病毒)。优势:灵敏度高(可检测fM级目标),动态范围广。2.逆转录PCR(RT-PCR)试剂盒特点:整合逆转录酶,将RNA转录为cDNA后扩...
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科研检测pcr试剂盒使用方法
2025-09-22
科研检测pcr试剂盒使用方法PCR试剂盒使用方法1.实验前准备环境消毒:实验室需提前用紫外线照射30分钟,确保无菌环境。工具准备:冰盒、离心机、移液器、灭菌PCR管等需提前备齐,操作时佩戴手套和口罩。试剂检查:确认试剂盒在有效期内,核对组分是否齐全(如2×TaqMix、引物、dNTPs等)。2.反应体系配制试剂解冻:除酶组分外,其他试剂...
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RNA逆转录实验中,如何判断RNA是否降解?
2025-09-22
RNA逆转录实验中,如何判断RNA是否降解?RNA降解的检测方法琼脂糖凝胶电泳完整RNA:电泳后应显示清晰的28S和18SrRNA条带,28S亮度约为18S的2倍(28S:18S≈2:1)。降解RNA:条带模糊、拖尾或比例异常(如28S亮度显著降低),甚至出现低分子量弥散。DNA污染:若加样孔附近出现荧光区带,提示可能存在DNA污染。紫外分光光度...
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RNA逆转录实验常见问题及解决方案
2025-09-19
RNA逆转录实验常见问题及解决方案1.RNA模板降解问题:RNA易被RNase降解,导致cDNA合成失败或产量低。解决方案:全程冰上操作,使用RNase-free耗材(如枪头、离心管)。加入RNase抑制剂(如RiboLock)保护RNA。通过琼脂糖凝胶电泳检测RNA完整性(28S/18S条带比例应为2:1)。2.RNA定量不准确问题:R...
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RNA逆转录试剂盒操作步骤及实验原理
2025-09-19
RNA逆转录试剂盒操作步骤及实验原理RNA逆转录实验原理RNA逆转录是通过逆转录酶将RNA模板(如mRNA)转化为互补DNA(cDNA)的过程,其核心原理是逆转录酶以RNA为模板,在引物(如OligodT或随机引物)引导下合成cDNA链。该技术广泛应用于基因表达分析、病毒检测等领域,其关键步骤包括:引物结合:OligodT引物结合mRNA的Poly(A)...
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竞争ELISA测抗体亲和力实验流程
2025-09-18
竞争ELISA测抗体亲和力实验流程一、实验原理竞争ELISA通过待测抗体与酶标抗原竞争结合固相抗原,显色信号强度与抗体浓度成反比,适用于小分子抗原或半抗原的检测。二、实验步骤试剂与样本准备标准品倍比稀释(如S1-S7),待测样本平衡至室温。特异性抗体稀释为工作液(如1:100),确保仅识别目标抗原。竞争反应将样本与抗体工作液加入包被抗原的酶标板,3...
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ELISA试剂盒能否只做一次标准曲线?
2025-09-18
ELISA试剂盒能否只做一次标准曲线?一、标准曲线需每次实验重新制作实验条件差异影响结果每次实验的孵育时间、温度、洗涤次数等条件可能存在微小差异,导致标准曲线不可复用。若多次实验共用同一标曲,可能因批次间试剂活性变化(如酶标抗体效价下降)引入误差。试剂盒说明书要求多数ELISA试剂盒明确要求每次实验需重新绘制标准曲线,以确保数据准确性。二、特殊情况...
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如何预防ELISA实验样本处理错误?
2025-09-17
如何预防ELISA实验样本处理错误?一、样本采集与保存规范抗凝剂选择与处理使用EDTA抗凝血浆时需立即颠倒混匀5-8次,避免局部凝血。避免使用肝素钠(可能干扰抗原-抗体结合)或含叠氮钠的保存液(抑制HRP酶活性)。保存条件优化短期检测(≤7天)样本可4℃保存,长期需分装后-80℃冻存,避免反复冻融(3次)导致蛋白降解。组织样本需加入蛋白酶抑制剂(如...
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病理切片盒的分类有哪些
2025-09-17
病理切片盒的分类有哪些病理切片盒的分类病理切片盒根据用途、材质和存储对象可分为以下几类:按用途分类诊断性切片盒:用于存放手术切除或活检的病理切片,支持常规HE染色和免疫组化分析。研究性切片盒:存放实验动物或组织库样本,适用于特殊染色和分子生物学研究。术中快速切片盒:专为术中快速病理诊断设计,需快速存取和标识。按存储对象分类蜡块盒:存放未切片...